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偽狂犬病是由偽狂犬病毒（PRV）引起的豬和多種動(dòng)物共患的一種急性傳染病。豬偽狂犬病主要引起仔豬的高死亡率和妊娠母豬的繁殖障礙，流行廣泛，一旦傳入豬群，將導(dǎo)致巨大經(jīng)濟(jì)損失，且很難根除。
在豬的預(yù)防免疫工作中,最值得關(guān)注的就是強(qiáng)化免疫的接種時(shí)機(jī)問(wèn)題。在過(guò)高的抗體水平進(jìn)行免疫,過(guò)高的抗體水平還會(huì)中和疫苗,影響疫苗的免疫效果,導(dǎo)致免疫失??；在較低的抗體水平進(jìn)行免疫,又會(huì)出現(xiàn)抗體保護(hù)真空期,威脅豬的健康。該試劑盒檢測(cè)反映抗體水平，利于指導(dǎo)免疫時(shí)機(jī)。
【使用意義】
接種豬偽狂犬疫苗后，并不能保證產(chǎn)生保護(hù)性抗體。由于多種因素可能導(dǎo)致豬不產(chǎn)生或產(chǎn)生低水平豬偽狂犬病毒抗體。通過(guò)使用本試劑，對(duì)免疫豬偽狂犬疫苗抗體動(dòng)態(tài)水平進(jìn)行監(jiān)測(cè)，能快速準(zhǔn)確的評(píng)價(jià)免疫程序，驗(yàn)證免疫效果；結(jié)合免疫后抗體變化特征，能快速選擇最佳的第二次免疫時(shí)間，有效的制定和實(shí)施免疫計(jì)劃。
【使用時(shí)間】
①豬偽狂犬病毒疫苗免疫后免疫效果監(jiān)測(cè)
②平時(shí)的抗體監(jiān)測(cè)
【檢測(cè)原理】
包被經(jīng)純化的豬偽狂犬病毒，抗豬IgG抗體作為酶標(biāo)記抗體，利用間接法來(lái)檢測(cè)被檢材料中是否含有豬偽狂犬病毒抗體。
【產(chǎn)品內(nèi)容】
1.豬偽狂犬病毒抗原包被微孔板條：96Tx2
2.酶標(biāo)記物：22ml×1
3.樣品稀釋液：20ml×1
4.顯色劑A：12 ml×1
5.顯色劑B：12 ml×1
6.洗滌液（用前1：25稀釋）：25 ml×1
7.豬偽狂犬病毒抗體陽(yáng)性對(duì)照血清：1.5 ml×1
8.豬偽狂犬病毒抗體陰性對(duì)照血清：1.5 ml×1
9.終止液：12 ml×1
10.封口膜：6張
11.密封袋：1個(gè)
12.說(shuō)明書：1份
【操作步驟】
1.使用前將試劑盒置室溫30分鐘，恢復(fù)至室溫。
2.取所需用量包被微孔板條，設(shè)空白、陰性及陽(yáng)性對(duì)照各2孔，未用的板條盡快密封，2～8℃保存。
3.陰性、陽(yáng)性對(duì)照孔分別加陰性、陽(yáng)性對(duì)照血清100μl；樣品孔每孔先加樣品稀釋液90μl，再加樣品10ul（或樣本1：10稀釋后加100μl）；空白對(duì)照孔不加。
4.混勻，置37℃溫浴30分鐘。
5.扣去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液，靜置60秒后棄去，重復(fù)洗滌5次，拍干。
6.每孔加酶標(biāo)記物100μl（空白孔除外）。
7.置37℃溫浴30分鐘。
8.洗滌，同步驟5。
9.每孔依次加顯色劑A、顯色劑B各50μl，混勻，37℃避光反應(yīng)10分鐘。
10.每孔加終止液50μl，混勻，置酶標(biāo)儀450nm處測(cè)各孔A值（建議用雙波長(zhǎng)450nm、630nm）。
【結(jié)果判定】
1.陰性對(duì)照：正常情況下，陰性對(duì)照孔A值≤0.1；
2.陽(yáng)性對(duì)照：正常情況下，陽(yáng)性對(duì)照孔A值≥0.4；
3.臨界值（C.O.）的計(jì)算：臨界值=0.15+陰性對(duì)照孔均值；所有陰性、陽(yáng)性對(duì)照和樣品的A值均須減去空白平均值后作為計(jì)算值；陰性對(duì)照孔A值大于0.10時(shí)應(yīng)舍棄，如所有陰性對(duì)照孔A值都大于0.10時(shí)須重復(fù)實(shí)驗(yàn)；陰性對(duì)照孔低于0.05時(shí)以0.05計(jì)算。
4.結(jié)果判定：
檢測(cè)標(biāo)本A450值≥臨界值判定為本試驗(yàn)陽(yáng)性；檢測(cè)標(biāo)本A450值＜臨界值判定為本試驗(yàn)陰性。
【注意事項(xiàng)】
1.操作時(shí)必須戴手套，穿工作衣，嚴(yán)格健全和執(zhí)行消毒隔離制度。
2.試驗(yàn)結(jié)果的判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn)。
3.樣品稀釋液應(yīng)用加液器加注，并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性。
4.洗滌時(shí)各孔均需加滿液體，防止孔口有游離酶不能洗凈。
5.所有樣品洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。
6.微孔板從冷藏環(huán)境中取出時(shí)應(yīng)在室溫中平衡至潮氣干盡后方可，未用完的微孔板須放入有干燥劑的密封袋中保存。
7.用于檢測(cè)的樣品應(yīng)保持新鮮。
8.剩余樣品及廢棄物應(yīng)經(jīng)121℃高壓蒸汽滅菌30分鐘，或用5.0g/L次氯酸鈉等消毒劑處理30分鐘后廢棄。
9.不同批號(hào)試劑組分不得混用。
【保存與有效期】
于2～8℃避光保存，有效期自成品檢定合格之日起為12個(gè)月。

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